Hoefer HE33 Manual do Utilizador Página 16

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Rapides, à haute tension  pistes
Certaines applications, telles que le dépistage des 
échantillons ou le contrôle de la pureté de l’échan-
tillon, qui peut être accompli rapidement dans des 
conditions de tension. Refroidir la base (-20 °C) et de 
limiter la course de 5 minutes ou moins à 500 V.
Plus lent, moinsde tension fonctionne
Un gradient de tension de 12 V/cm (150 V) sépare 
0,1 à 23 kb fragments d’une digestion Hind III de λ
ADN dans 30 à 40 minutes (en utilisant 1% d’aga-
rose gel et du tampon TBE 0.5X en cours d’exécu-
tion). Sinon, en utilisant les mêmes solutions, cet 
échantillon peut être exécuté à 24 V/cm (300 V) avec 
une résolution de bande acceptable dans 20 à 30 
minutes. Réfrigérer la base avant utilisation.
Tableau 1: paramètres de tension et les 
paramètres  recommandés terme
tension  pente  temps  
(V)  (V/cm)  (min)
500  40  5*
400  31  10*
300  24  20*
200  16  30 à 40
150  12  30 à 60
* Pour  les cycles rapides de 20 minutes ou moins, utilisez 
TBE 0.5X et réfrigérer la base à -20 °C avant utilisation.
Tension et les temps sont pour 1% d’agarose NA, TBE 0.5X 
et une base réfrigérés.
Après la séparation
Important! Coupez l’alimentation électrique, débran-
chez les fils, et retirez le couvercle.
Si aucune bromure d’éthidium est ajouté au gel ou 
de l’échantillon avant l’exécution, d’un colorant du 
gel dans une solution de 0,5 à 1,0 µg/ml de bromure 
d’éthidium dans l’eau ou un tampon.
Nettoyez l’unité tel que décrit ci-dessous.
Remarque: pour calculer le 
gradient de tension, diviser le 
réglage de la tension par la 
distance entre les électrodes 
(12,7 cm).
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